CRISPR-Cas9手艺是现在大热的基因编纂手艺,它应用短RNA(gRNA)去指导核酸酶(Cas9)抵达DNA靶点。该手艺运用简朴并且扩展性强,已被普遍应用于实验室研讨、生物医学研讨、动植物基因工程等范畴。包孕竖立种种遗传润饰的形式生物模子、竖立基因调控(如敲除、插入、抑止、激活)细胞系、动植物育种、遗传疾病修复、癌症等重大疾病医治和相干药物靶点挑选等。

泓迅科技供应sgRNA质粒构建服务,针对差别物种(植物、动物等)供应多种质粒构建计划,能够最大水平的婚配实行所用质料,进步质粒构建的成功率,为您供应快速、优良的sgRNA载体构建服务。

CRISPR-Cas9 sgRNA载体构建服务上风:

  1. 齐形式物种sgRNA设想:可完成13种形式植物的sgRNA设想服务;
  2. 雄厚的质粒构造:可供应多种物种经由考证的质粒构造,知足您的实行需求;
  3. 成功率下:针对差别基因设想多个靶点,进步质粒构建的成功率;
  4. 质粒考证服务:构建质粒的同时,也可供应sgRNA活性考证服务,检测sgRNA活性,进步实行成功率。

sgRNA及Cas9质粒构建载体图

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CRISPR-Cas9 sgRNA载体构建服务流程

步调 服务内容
明白物种和载体 差别物种差别载体
设想靶点 一样平常正在差别转录产品的配合外显子上设想3-5个靶点,尽量损坏主要的domain和所有转录产品isoform。
常用靶点设想网站:
分解 分解前确认检测靶点是不是存在SNP(若是存在SNP,则不能用T7E1酶检测是不是存在突变)
靶点切割活性检测 293T细胞内检测SSA活性 酶体外切割活性考证(推荐)
内源活性考证      
(有条件挑选)
若目标细胞转染率下,如293T细胞,可转染72h后提基因组,扩增靶序列,T7E1酶切考证,进一步测序考证。

 
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