shRNA(short hairpin RNA)是一段具有严密发卡环的RNA序列,包孕两个短的反向反复序列和衔接两个反复序列的Loop区,是一种将小滋扰RNA(siRNA)运送到活体中的情势。siRNA序列能够作为“短发夹”构造克隆进质粒载体中,质粒进入细胞后,该发夹序列表达出来构成单链RNA(dsRNA),并进入RNA滋扰(RNAi)通路,终究实现基因缄默沉静的结果。

shRNA文库运用偏向

shRNA文库运用异常普遍,重要运用正在基因功用研讨和基因治疗等方面:

  1. 基因功用研讨:应用shRNA文库停止下通量挑选,说明旌旗灯号转导通路、发明新的药物感化靶点[1-3]
  2. 基因治疗:运用肿瘤特异性启动子如hTERT启动子、survivin启动子或构造特异性启动子如酪氨酸酶启动子、骨钙素启动子指导针对某些癌基因或抗凋亡份子的siRNA或shRNA表达,从而到达特异性杀伤肿瘤细胞的目标[4]
  3. 医治病毒性疾病: siRNA能够介导人类细胞的细胞间抗病毒免疫,病毒感染能被针对病毒基因和相干宿主基因的siRNA所阻断[5]

shRNA文库服务上风

  1. 可定制化对shRNA文库载体停止革新,实现可引诱型shRNA文库或带有特别挑选符号的shRNA文库;
  2. shRNA文库特性较稳固,不容易降解;
  3. Syno® 3.0下通量分解shRNA文库,可收缩分解周期,低落分解本钱。

shRNA文库泓迅案例
运用Syno® 3.0芯片分解的要领,能够下通量、低价钱的分解shRNA序列,可定制化的构建shRNA文库载体,并可停止缓病毒包装服务。经由NGS考证后,终究检测shRNA文库正确率正在70%以上。
shRNA library

shRNA文库构建流程图

服务详情

服务称号 产物/服务内容 托付周期 托付项目 价钱
shRNA文库构建 分解shRNA芯片并构建文库 40-50个工作日 液态库质粒50-200ug,甘油菌一管 征询

参考文献

[1] A comparison of multiple shRNA expression methods for combinatorial RNAi. Genet Vaccines Ther. 2011 Apr 17

[2] shRNA library screening identifies nucleocytoplasmic transport as a mediator of BCR-ABL1 kinase-independent resistance. Blood. 2015 Mar 12

[3] shRNA screening identifies JMJD1C as being required for leukemia maintenance. Blood. 2014 Mar 20

[4] Construction of a novel vector expressing the fusion suicide gene yCDglyTK and hTERT-shRNA and its antitumor effects. Exp Ther Med. 2012 Sep;4(3):

[5]Qiu Y, Xu Y, Zhou X.Human virus-derived small RNAs can confer antiviral immunity in mammals. Immunity. 2017 Jun 20;46(6):992-1004

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