当代新药研发的主要义务是挑选、肯定和制备有用的药物靶点。CRISPR-Cas9正在多种范例的细胞和构造中都具有高效准确的基因编纂才能,据近期文献[1-3]报导,以CRISPR-Cas9为根蒂根基的基因编纂手艺正在一系列药物靶点挑选中展示出了极大的运用远景。

经由过程构建sgRNA文库,应用缓病毒转染细胞,对疾病发作、保持癌细胞发展、存活及生长等历程具有重要作用的卵白及其构造域的大规模挑选,联合NGS及数据剖析,对寻觅适宜的药物感化靶点,研发新药尤其是癌症医治药物具有重要意义。

研讨思绪

新药研发靶点挑选研讨思绪
  1. 基因组大概Panel
    范围内的基因调取取
    sgRNA设想
  1. Syno®2.0基因
    分解
    载体构建
  2. sgRNA文库构建
  3. 缓病毒文库制备
  1. 细胞生机、增殖、凋
    亡等表型检测
  2. 联合免疫染色、流式
    细胞术等体式格局获得筛
    选后的细胞
  1. 应用NGS及生物信息剖析
    获得挑选前后的基因组信息
  2. 得到富集sgRNA所对应的
    候选基因
  3. 后续细胞株构建或植物模
    型竖立

新药研发靶点挑选服务上风

right一站式服务
泓迅科技供应从sgRNA设想、sgRNA文库构建、缓病毒包装,到靶点挑选及后续考证事情的整体解决方案

right专利Syno® 3.0芯片分解平台
下通量、低成本分解sgRNA文库,文库构建覆盖率95%以上

right下通量功用挑选平台
供应齐基因组文库挑选,平行剖析大量细胞的基因功用,包孕细胞生机、增殖、凋亡等表型检测,审定相干候选基因

right生物信息剖析
经验丰富的生物信息剖析团队,可经由过程剖析NGS数据,挑选出靶点候选基因

新药研发的靶点挑选运用案例

【运用案例1】 基因敲除要领挑选取人类肿瘤发展和抗药性相干的基因

【运用案例2】基因组挑选要领检测小鼠体内肿瘤细胞的发展和转移状况

【运用案例3】 lentiCRISPR体系载体改进及GeCKO文库用于功用基因组文库挑选

参考文献
[1].Parnas, O., et al., A Genome-wide CRISPR Screen in Primary Immune Cells to Dissect Regulatory Networks. Cell, 2015. 162(3): p. 675-86.
[2].Sanjana, N.E., Genome-scale CRISPR pooled screens. Anal Biochem, 2016.
[3].Varshney, G.K., et al., A high-throughput functional genomics workflow based on CRISPR/Cas9-mediated targeted mutagenesis in zebrafish. Nat Protoc,2016. 11(12): p. 2357-2375.